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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:2941
更新時間:2024-11-04
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
染料法熒光定量PCR試劑盒前提:目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點:
1.根據(jù) 指標的保守序列設計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝型肝炎核心抗原(HBV)(18-27)
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝型肝炎病毒核心(107-115)
SRPRB antibody原裝、分裝型肝炎病毒核心,(型肝炎抗原31)
TMEM35 antibody原裝、分裝型肝炎病毒核心蛋白(128-140)
PIEZO2 antibody原裝、分裝型肝炎病毒膜蛋白(183-191)
tenomodulin antibody原裝、分裝型肝炎病毒膜蛋白(335-343)
JAM-C antibody原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶(455-463)
Human SLC5A4 peptide原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶(502-510)
IRHOM1 antibody原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶(655-663)TIMP1 antibody [EP1549RY]原裝、分裝胃泌素釋放肽,人
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽,豬
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽-Lys(生物素),人
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽(1-6),人
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃泌素四肽
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃饑餓素,人
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃饑餓素,大鼠
MMP26 antibody [EP1283Y]原裝、分裝生長激素釋放子,小鼠
MMP26 antibody [EP1283Y]原裝、分裝生長激素釋放子,綿羊
染料法熒光定量PCR試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子2檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子3檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子4檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制子1檢測試盒5mg
基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素檢測試盒50mg
基質(zhì)細胞衍生子1a檢測試盒20mg
基質(zhì)細胞衍生子1β檢測試盒100mg
激動異構(gòu)酶/細胞分裂素MB檢測試盒0.2ml
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。