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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-04
小鼠氣管平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
氣管 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7018 |
細胞簡介:
小鼠氣管平滑肌分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關鍵。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
札如病毒(SV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
人星狀病毒(HastV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
肉毒桿菌(A/B型)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
肉毒桿菌(E/F型)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
植物鈣調(diào)0酸酶(CaN)試劑盒
Human ai perinuclear factor (APF) ELISA Kit 人抗核周因子抗體(APF)試劑盒
Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豬壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforADV-IgG(HumanAdenovirusIgG)ELISAKit人腺病毒IgG
血液樣品固著液(Aceticalcohol固著液)50毫升
MouseSomatostatin,SSELISAKit小鼠(SS)試劑盒
MRVI1蛋白抗體
FITC標記人CD41單克隆抗體
HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mgRRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)
MMP8重組人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 標簽) Protein
ACOT13 Protein Human 重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 (His 標簽)
IGF1R Protein Human 重組人 IGF1R / CD221 蛋白 (His 標簽)
RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mgRRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)
ACOT13 Protein Human 重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 (His 標簽)
HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
IGF1R Protein Human 重組人 IGF1R / CD221 蛋白 (His 標簽)
MMP8重組人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠氣管平滑肌細胞大鼠復制蛋白A1(RPA1)試劑盒 ,英文名: RPA1 ELISA Kit
Rat beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒
RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforDsg-1(Humandesmogleins1)ELISAKit人橋粒芯糖蛋白-1
細胞培養(yǎng)液氧化應激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(超氧陰離子)100次
RatHistamine,HISELISAKit大鼠組胺(HIS)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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